很多朋友对培养NK-92和NK-92MI细胞没有信心，这种细胞培养时需要特别注意以下几点：
         （超级干货，建议收藏以免使用时找不到了）
       NK-92和NK-92MI细胞均为悬浮生长，大部分细胞聚集成团，少数分散的细胞，并且细胞间隙会有较多的死细胞和细胞碎片；
       NK-92和NK-92MI细胞对营养需求比较高，建议使用进口胎牛血清和马血清培养，白介素2的质量对细胞的生长影响非常大，建议新配制的白介素2在4度保存不超过1周。
       换液周期为2天，建议半量换液1-2次后离心全量换液一次的方式操作，并且尽量减少离心对细胞机械损伤的次数。
 

      1. 细胞生长时聚集的细胞团会越来越大，细胞团在显微镜下观察为白色透亮的是正常细胞，

      2. 如果细胞聚集很多，出现了细胞团中部发暗时可以在换液后将细胞团轻轻摇散，或者用移液器轻轻吹散，吹打力度不可过大，否则会出现大量死细胞和细胞碎片。

      3. 细胞培养中没有聚团的细胞活性会很低。细胞对营养要求很高，记得千万不能让细胞团块太大而导致营养不足，那样的话细胞48小时就会死亡。

      4. 因为细胞成团长，细胞计数可能会不准确，团块不可以吹散计数，散落的细胞细胞活性会不好，所以细胞检测活性有时也是不准确的。

    运输条件可能会对细胞造成一定的影响，当收到上海WHELAB寄送的细胞后请按以下方法处理：

      A. 收到细胞后静置，显微镜下观察细胞并拍照，主要找聚集的细胞团；

      B. 将培养瓶竖置，静置4~6h，肉眼观察大部分细胞团都沉到底部后，将多余的培养基轻轻倒入50ml离心管中离心收集一部分细胞，底部留3~4ml（剩余20ml左右时可换用移液器吸取上清，保证大部分细胞团留在瓶中），再补加3~4ml新鲜培养基进行培养，若细胞量较多可分成两瓶，离心收集的细胞也可单独接种培养；

      C. 细胞对机械损伤特别敏感，所以最好不要离心，或减少离心。

   该类细胞复苏时注意不要离心处理，提前准备一个离心管，加10ml培养基，把溶解后的冻存细胞接入，静置2小时左右，待细胞沉降在底部，去上清，再用完全培养基接到T25培养瓶内进行培养。

     总体来说，养好NK92和NK92MI细胞不太容易，大家注意尽量减少离心对细胞的损伤，白介素2尽量现用现配，保持培养基新鲜和活性。关注上海WHELAB细胞，培养细胞不用愁，希望这些方法能够对您有所帮助，祝您的细胞培养工作顺利进行!